4月19日，國際植物學(xué)權(quán)威學(xué)術(shù)期刊《植物學(xué)雜志》(The Plant Journal) 在線發(fā)表安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶樹生物學(xué)與資源利用國家重點實驗室夏濤教授團隊的題為《深入了解?；瘷C制：共表達絲氨酸羧肽酶類酰基轉(zhuǎn)移酶和非催化伴侶旁系蛋白》(Insights into acylation mechanisms: Co-expression of serine carboxypeptidase-like acyltransferases and their noncatalytic companion paralogs)的文章，最終揭開了茶樹酯型兒茶素合成之謎。
我國的茶葉品類豐富，飲茶人群眾多。茶產(chǎn)品具有獨特的苦澀風味，這與茶鮮葉中富含的酚類物質(zhì)，特別是酯型兒茶素密切相關(guān)。酯型兒茶素除了影響茶葉的感官品質(zhì)，同時也是對人體健康非常有益的一類物質(zhì)，具有抗氧化，減肥降脂，抗病毒等功效。
酯型兒茶素作為茶葉中的“明星物質(zhì)”，它的生物合成通路始終是個謎題。究竟是什么基因在控制它的合成?這也成為當前茶樹生物學(xué)領(lǐng)域的研究重點。
在國家基金委支持下，安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶學(xué)科研團隊多年來一直堅持探索茶樹酯型兒茶素的合成及水解途徑。
· 2012年，夏濤課題組第一次證實茶樹酯型兒茶素沒食子酰基化過程涉及兩步反應(yīng)(Journal of Biological Chemistry，2012)。
· 2016年，酯型兒茶素沒食子糖基化形成的CsUGT84A基因功能得到驗證(Journal of Experimental Botany，2016)。
· 2019年，課題組成功解析了非酯型兒茶素合成關(guān)鍵酶在聚合態(tài)兒茶素合成中的作用機制(The Plant Journal，2019)。
· 2020年，課題組首次報道參與酯型兒茶素水解的植物單寧酶基因家族Tannase(New Phytologist，2020)。
但是茶樹酯型兒茶素合成機理的研究舉步維艱，進展緩慢。
經(jīng)過近十年的探索，課題組通過酶學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)手段，利用傳統(tǒng)的蛋白分離純化手段，從茶樹中純化了酯型兒茶素合成酶，再經(jīng)過蛋白質(zhì)譜鑒定和匹配茶樹基因組，篩選到兩條SCPL同源基因序列。課題組將其分別命名為CsSCPL4和CsSCPL5。
▲ 基因共表達策略(a)及茶樹酯型兒茶素合成代謝途徑(b)
這兩條基因在茶樹不同組織器官具有相同的表達規(guī)律，都是在幼嫩葉高表達，這也與酯型兒茶素的積累規(guī)律一致。為了進一步驗證兩條SCPL基因的功能，課題組通過植物異源蛋白表達系統(tǒng)進行酶學(xué)實驗，結(jié)果表明，當CsSCPL4和CsSCPL5在煙草植株體內(nèi)單獨表達時，重組蛋白不具有酶催化活性;只有當CsSCPL4和CsSCPL5在煙草植株體內(nèi)共表達時，重組蛋白具有明顯的催化活性，能夠催化底物生成酯型兒茶素。
▲ 富含單寧植物中的SCPL4?；D(zhuǎn)移酶和它們的非催化伴侶
課題組通過蛋白序列分析比對發(fā)現(xiàn)，CsSCPL4具有保守的催化三殘基(S-D-H)，而CsSCPL5的催化三殘基存在突變現(xiàn)象，為T-D-Y。課題組后續(xù)通過一系列點突變實驗證實了CsSCPL4具有酶催化功能，CsSCPL5則具有非催化伴侶功能。隨后的蛋白互作實驗進一步證明了CsSCPL4和CsSCPL5存在相互作用。蛋白質(zhì)免疫印跡實驗表明，在共表達系統(tǒng)中，CsSCPL5能夠維持CsSCPL4前肽的穩(wěn)定性，促進CsSCPL4前肽加工為成熟蛋白，進而發(fā)揮酶功能。
這一研究成果為茶樹酯型兒茶素的代謝調(diào)控提供了重要的基因靶點，也為茶樹遺傳改良和品質(zhì)提升等領(lǐng)域提供堅實的理論基礎(chǔ)。
茶樹生物學(xué)與資源利用國家重點實驗室博士生姚勝波和生命科學(xué)學(xué)院劉亞軍教授為論文共同第一作者，夏濤教授、高麗萍教授和美國北卡羅萊納州州立大學(xué)謝德玉教授為共同通訊作者。相關(guān)工作得到國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學(xué)基金和安徽省自然科學(xué)基金的資助。
來源：中國茶葉加工
如涉及版權(quán)問題請聯(lián)系刪除
4月19日，國際植物學(xué)權(quán)威學(xué)術(shù)期刊《植物學(xué)雜志》(The Plant Journal) 在線發(fā)表了我校茶樹生物學(xué)與資源利用國家重點實驗室夏濤教授團隊的題為《深入了解?；瘷C制：共表達絲氨酸羧肽酶類?；D(zhuǎn)移酶和非催化伴侶旁系蛋白》(Insights into acylation mechanisms: Co-expression of serine carboxypeptidase-like acyltransferases and their noncatalytic companion paralogs)的文章，最終揭開了茶樹酯型兒茶素合成之謎。
圖1.基因共表達策略(A)及茶樹酯型兒茶素合成代謝途徑(B)
眾所周知，茶樹富含酚類物質(zhì)，其中酯型兒茶素是綠茶多酚的主要組成成分，約占鮮葉干重的8-12%，是形成綠茶收斂性滋味的決定性成分，也是茶飲料的抗氧化、抗菌、抗病毒和抗動脈硬化等健康功效的主要成分。
在國家基金委支持下，課題組圍繞著茶樹酯型兒茶素合成及水解途徑展開持續(xù)研究。早在2012年，夏濤課題組第一次證實茶樹酯型兒茶素沒食子酰基化過程涉及兩步反應(yīng)(Journal of Biological Chemistry, 2012)，其中涉及沒食子糖基化形成的CsUGT84A 基因功能于2016年得到驗證(Journal of Experimental Botany, 2016)。2020年課題組首次報道參與酯型兒茶素水解的植物單寧酶基因家族Tannase(New Phytologist, 2020)。課題組還成功解析了非酯型兒茶素合成關(guān)鍵酶在聚合態(tài)兒茶素合成中的作用機制(The Plant Journal, 2019)。但是茶樹酯型兒茶素合成機理的研究舉步維艱，進展緩慢。
圖2. 富含單寧植物中的SCPL4酰基轉(zhuǎn)移酶和它們的非催化伴侶
經(jīng)過近十年的探索，他們發(fā)現(xiàn)了一種簡單易行的共表達策略可用于驗證植物的SCPL?；D(zhuǎn)移酶基因功能，并證實有一對SCPL酰基轉(zhuǎn)移酶以獨特方式參與了茶樹、葡萄和柿子等植物的酯型兒茶素合成，其中由大小亞基組成的SCPL4?；D(zhuǎn)移酶具有酶催化功能;而SCPL4?；D(zhuǎn)移酶的旁系同源蛋白SCPL5酰基轉(zhuǎn)移酶則起作非催化伴侶功能，在維持SCPL4?；D(zhuǎn)移酶前肽穩(wěn)定性、促進SCPL4?；D(zhuǎn)移酶前肽加工為成熟蛋白中起重要作用。研究結(jié)果拓展了人們對SCPL?；D(zhuǎn)移酶的非催化伴侶功能的認知，也為解答茶樹為什么積累酯型兒茶素的科學(xué)問題提供了新的視角。
茶樹生物學(xué)與資源利用國家重點實驗室博士生姚勝波和生命科學(xué)學(xué)院劉亞軍教授為論文共同第一作者，夏濤教授、高麗萍教授和美國北卡羅萊納州州立大學(xué)謝德玉教授為共同通訊作者。相關(guān)工作得到國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學(xué)基金和安徽省自然科學(xué)基金的資助。
來源 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)如有侵權(quán) 請聯(lián)系刪除
▲貴州鳳岡
兒茶素、沒食子酸、咖啡堿等茶功能成分具有多種生物活性和藥理功效，包括抗氧化，抗癌，抗炎，降脂減肥，降低膽固醇，降血糖等，在普通食品、保健食品、醫(yī)藥、日化用品、功能飼料等均有應(yīng)用，開發(fā)前景非常廣闊。
☆ 兒茶素是茶多酚中含量相對較高、生物活性較強的化學(xué)物質(zhì)。兒茶素具有多個酚羥基的分子結(jié)構(gòu)，在貯藏和應(yīng)用的過程中，易受到溫度、酸堿、空氣、濕度、金屬離子等因素影響，發(fā)生降解、氧化聚合等反應(yīng)，從而改變其原有的物化性質(zhì)、風味品質(zhì)、生物活性。不同類型的酯型兒茶素和非酯型兒茶素的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，決定了其穩(wěn)定性、氧化還原特性、水解特性、異構(gòu)特性等均存在較大差異。因此，如何保持其穩(wěn)定性非常關(guān)鍵，相關(guān)的穩(wěn)態(tài)化技術(shù)研究是茶學(xué)領(lǐng)域熱點研究問題之一。
☆ 沒食子酸是茶葉中可水解多酚類物質(zhì)的組成部分，在云南普洱茶中的含量相對較高，不僅與茶葉品質(zhì)呈正相關(guān)，而且具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗突變等多種生物活性。
☆ 咖啡堿最早是在咖啡中被發(fā)現(xiàn)，但茶葉中的咖啡堿含量比咖啡中的含量高，咖啡中咖啡堿的含量為1%~2%左右，而茶葉中咖啡堿的含量為2%~5%左右，約占茶葉生物堿總量的95%以上?？Х葔A不僅是茶葉風味品質(zhì)特征成分之一，而且具有強心、利尿、興奮中樞神經(jīng)等作用。有關(guān)沒食子酸和咖啡堿在不同溫度條件下的穩(wěn)定性文獻報道相對較少。
溫度是影響兒茶素、沒食子酸、咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素，對其在終端應(yīng)用體系的物化特性、風味品質(zhì)、生物活性保持具有非常重要的影響。30 ℃是發(fā)酵類茶食品、茶酒的發(fā)酵溫度，而且也是紅茶發(fā)酵工序葉溫重要參數(shù)，溫度過高則發(fā)酵變化過分激烈、香低味淡、色暗，溫度過低則發(fā)酵時間延長、內(nèi)質(zhì)轉(zhuǎn)化不充分、風味寡淡。60 ℃不僅是普洱茶殺青工藝的控制溫度，而且也是茶點心、茶面包等熱加工茶食品貯存的底限溫度。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，探索了30 ℃、60 ℃溫度條件下茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的變化規(guī)律，分析溫度對酯型兒茶素、非酯型兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的影響，以期為茶產(chǎn)品貯藏保鮮和穩(wěn)態(tài)化利用研發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
01
材料與方法
1、試驗方法
(1) 貯藏穩(wěn)定性設(shè)計
稱取0.5 g的98%茶多酚樣品，放入2 mL帶蓋圓底塑料管內(nèi)，加蓋密封貯藏，然后分別放置在溫度為30 ℃、60 ℃的恒溫箱中，以-18 ℃冰箱貯藏為對照，每隔7天取樣，連續(xù)70天取樣，取樣后的塑料管不再放回;分別配制1.0 mg/mL水溶液，HPLC檢測不同取樣點的酯型兒茶素(EGCG、GCG、ECG、CG)、非酯型兒茶素(EGC、GC、EC、C)、沒食子酸和咖啡堿的含量。
(2) 茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿HPLC檢測方法
色譜柱Hypersil BDS C18 (4.6 mm × 250 mm， 5 μm)，流動相A為2%乙酸，流動相B為100%乙腈，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測波長280 nm，進樣量5 μL，梯度洗脫，流動相B在12 min內(nèi)由6.5%線性梯度變化到8%，16 min變化到15%，20 min變化到25%，30 min回到初始狀態(tài)，平衡5 min。
2、數(shù)據(jù)處理
每個實驗重復(fù)三次，采用Minitab 19.0數(shù)據(jù)處理軟件，進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。
02
結(jié)果與分析
1、溫度對酯型兒茶素貯藏穩(wěn)定性的影響
通常情況下，茶多酚、兒茶素類物質(zhì)適宜低溫貯藏。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，考察了30 ℃、60 ℃條件下酯型兒茶素含量變化情況。
由圖1可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EGCG和GCG含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃和60 ℃條件下隨貯藏時間延長，EGCG含量均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，30 ℃條件EGCG含量與對照無顯著性差異，60 ℃條件下EGCG含量顯著低于對照，60 ℃條件下的EGCG含量下降幅度明顯大于30 ℃條件下。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長GCG含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長GCG含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;EGCG含量變化幅度大于GCG含量變化幅度，說明GCG熱穩(wěn)定性大于EGCG。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EGCG和GCG含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EGCG和GCG穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，EGCG穩(wěn)定性顯著降低，部分EGCG發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成GCG，導(dǎo)致了EGCG含量快速下降，而GCG含量不降反增，即60 ℃條件下以EGCG向GCG轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
由圖2可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的ECG和CG含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長ECG含量變化較小，與對照無顯著性差異，穩(wěn)定性較好，60 ℃條件下的ECG含量下降幅度較大，穩(wěn)定性較差。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長CG含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長CG含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;ECG含量變化幅度大于CG含量變化幅度，說明CG熱穩(wěn)定性大于ECG。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下ECG和CG含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，ECG和CG穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，ECG穩(wěn)定性顯著降低，部分ECG發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成CG，導(dǎo)致了ECG含量快速下降，而CG含量不降反增，即60 ℃條件下以ECG向CG轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
2、溫度對非酯型兒茶素貯藏穩(wěn)定性的影響
兒茶素在相對較高的溫度條件下易發(fā)生異構(gòu)化和自動氧化作用。由圖3的不同溫度貯藏條件下EGC和GC含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EGC和GC含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃和60 ℃條件下隨貯藏時間延長，EGC含量均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，30 ℃條件下EGC含量與對照呈顯著性差異，60 ℃條件下EGC含量與對照呈極顯著差異，60 ℃條件下的EGC含量下降幅度明顯大于30 ℃條件下。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長GC含量基本不變，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長GC含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;EGC含量變化幅度大于GC含量變化幅度，說明GC熱穩(wěn)定性大于EGC。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EGC和GC含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EGC降解或氧化聚合是其穩(wěn)定性下降的主要作用，而GC熱穩(wěn)定性較好;60 ℃條件下，部分EGC發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成GC，導(dǎo)致了EGC含量快速下降;GCG脫沒食子?；矔兂蒅C，但是由于GCG在60 ℃下幾乎沒減少，而60 ℃條件下GC含量不降反增，推測GC增加的主要原因是EGC差向異構(gòu)化作用，即60 ℃條件下以EGC向GC轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
由圖4的不同溫度貯藏條件下EC和C含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EC和C含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長EC含量基本不變，與對照無顯著性差異，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長EC含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，與對照呈顯著性差異。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長C含量逐漸下降，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長C含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異。EC含量變化幅度大于C含量變化幅度，說明C熱穩(wěn)定性大于EC。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EC和C含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EC和C穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，EC穩(wěn)定性顯著降低，部分EC發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成C，導(dǎo)致了EC含量快速下降。CG脫沒食子酸也會變成C，但是由于CG在60℃下幾乎沒減少，而60 ℃條件下C含量不降反增，推測C增加的主要原因是EC差向異構(gòu)化作用，即60 ℃條件下以EC向C轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
3、溫度對沒食子酸貯藏穩(wěn)定性的影響
由圖5的不同溫度貯藏條件下沒食子酸含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的沒食子酸含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長沒食子酸含量略有降低，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長沒食子酸含量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，但是30 ℃和60 ℃的沒食子酸含量與對照相比均無顯著性差異，即沒食子酸在30 ℃和60 ℃溫度條件下穩(wěn)定性均較好。酯型兒茶素EGCG、GCG、ECG、CG在一定溫度條件下，可發(fā)生脫沒食子?；饔?。
結(jié)合圖1、圖2和圖5結(jié)果，推測：60 ℃條件下酯型兒茶素EGCG、GCG、ECG、CG在發(fā)生差向異構(gòu)作用、降解或氧化聚合的同時，也發(fā)生了脫沒食子?；磻?yīng)，進而出現(xiàn)圖5的60 ℃條件下沒食子酸含量隨貯藏時間延長不降反升的現(xiàn)象。比較而言，沒食子酸在3個溫度條件下的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。
4、溫度對咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響
由圖6的不同溫度貯藏條件下咖啡堿含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的咖啡堿含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長咖啡堿含量基本沒有變化，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長咖啡堿含量呈現(xiàn)略微下降的趨勢，但是30 ℃和60 ℃的咖啡堿含量與對照相比均無顯著性差異，即咖啡堿在30 ℃和60 ℃溫度條件下穩(wěn)定性均較好。
將圖1、圖2、圖3、圖4的兒茶素含量變化的動力學(xué)曲線，以及圖5的沒食子酸含量變化的動力學(xué)曲線，與圖6的咖啡堿含量變化動力學(xué)曲線比較，可以看出，在-18 ℃、30 ℃、60 ℃貯藏條件下，咖啡堿的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。
03
討論
兒茶素分子結(jié)構(gòu)的固有化學(xué)特性，決定了其在外界環(huán)境改變的情況下，不僅僅會發(fā)生差向異構(gòu)化作用，而且會發(fā)生氧化聚合、分解、水解、脫沒食子?；榷喾N作用，這些作用之間可能存在競爭或協(xié)同作用，在某些特定的條件下，可能有幾種作用同時產(chǎn)生。前人研究茶湯溶液中兒茶素類物質(zhì)的穩(wěn)定性，結(jié)果表明，82 ℃有利于兒茶素發(fā)生降解和異構(gòu)化。研究表明溫度較低條件下茶湯中兒茶素主要發(fā)生降解反應(yīng)，溫度超過80 ℃時茶湯兒茶素主要發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)。采用不同溫度水浸提茶葉時發(fā)現(xiàn)，即使在低溫下浸提，茶湯中也有明顯的異構(gòu)化反應(yīng)，與此同時，其他的降解、氧化和聚合等反應(yīng)也同時存在。目前較多研究集中于茶葉功能成分在不同溫度溶液中的穩(wěn)定性，較少關(guān)注固體粉末不同溫度條件下的穩(wěn)定性。
文章研究了不同溫度條件下固體茶葉提取物中茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的變化規(guī)律，結(jié)果表明，在30 ℃條件下，EGC以降解或氧化作用為主，其它兒茶素相對穩(wěn)定性較好;60 ℃貯藏條件下，酯型兒茶素和非酯型兒茶素以差向異構(gòu)作用、脫沒食子?；饔脼橹?GCG熱穩(wěn)定性大于EGCG，CG熱穩(wěn)定性大于ECG，C熱穩(wěn)定性大于EC，GC熱穩(wěn)定性大于EGC;沒食子酸、咖啡堿的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，考察了30 ℃、60 ℃溫度條件下兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的穩(wěn)定性，可為兒茶素、沒食子酸和咖啡堿等功能成分在食品中的穩(wěn)態(tài)化應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。有關(guān)不同溫度條件下兒茶素的差向異構(gòu)化、氧化聚合、降解、脫沒食子酰基等多種作用的競爭或協(xié)同關(guān)系，以及兒茶素、沒食子酸、咖啡堿在食品、飲料、日化用品等不同體系的穩(wěn)態(tài)化應(yīng)用特性仍有待進一步研究。
作者簡介
張建勇
博士，助理研究員，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所茶葉深加工專家，德國布倫瑞克工業(yè)大學(xué)訪問學(xué)者，國家食藥同源產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟常務(wù)理事。研究方向為茶葉化學(xué)與多元化利用，主持省部級科研項目6項，發(fā)表中外文論文50余篇，參編著作1部，授權(quán)國家發(fā)明專利2項、實用新型專利6項，軟件著作權(quán)登記3項，獲獎1項。
基金項目：“十三五”國家重點研發(fā)計劃課題(2017YFD0400804);浙江省茶葉產(chǎn)業(yè)技術(shù)團隊項目(2020-2022);浙江省自然科學(xué)基金(LY18C160004)
具體內(nèi)容詳見《中國茶葉加工》雜志，2020年第4期文章《溫度對茶多酚制品中兒茶素、沒食子酸和咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響》，頁碼：69-75。作者：張建勇，王偉偉，崔宏春，薛金金，江和源。
引用格式：張建勇，王偉偉，崔宏春，等. 溫度對茶多酚制品中兒茶素、沒食子酸和咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響[J]. 中國茶葉加工, 2020(4): 69-75.
來源：中國茶葉加工
如涉及版權(quán)問題請聯(lián)系刪除
